抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原熱修復(fù)的方法分析
抗原修復(fù)鍋修復(fù)方法的優(yōu)點(diǎn)是暴露抗原決定簇的效果較好，結(jié)果穩(wěn)定，受環(huán)境條件影響小（特別適合于高原地區(qū)），可重復(fù)性高，是一個(gè)理想的修復(fù)方法；但對(duì)于組織處理不佳的切片，容易脫片；同時(shí)用高pH值的抗原修復(fù)液會(huì)引起細(xì)胞核的碎裂和非特異性的增加，因此，盡量避免使用高pH值的抗原修復(fù)液（EDTA、EGTA），建議采用pH6.0的檸檬酸抗原修復(fù)液。
利用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原熱修復(fù)的技術(shù)，具體方法是：
1、將盛有抗原修復(fù)液的修復(fù)鍋在電磁爐上加熱至沸騰。
2、將脫蠟至蒸餾水的切片置入抗原修復(fù)液中加蓋進(jìn)行熱處理，當(dāng)氣閥噴氣后計(jì)時(shí)1.5-3分鐘（噴氣時(shí)間的差異主要是因?yàn)楹竺胬鋮s的方法不同：噴氣時(shí)間1.5-2分鐘，采用自然冷卻法，切片還浸在高溫的液體內(nèi)20多分鐘，抗原在高溫下繼續(xù)修復(fù)，因此，可縮短噴氣的時(shí)間；而快速冷卻，抗原修復(fù)立即被中止，因此，噴氣時(shí)間一般為3分鐘）。
3、自然冷卻20分鐘至緩沖液37℃以下時(shí)拿出切片（超過(guò)這個(gè)溫度拿出，會(huì)導(dǎo)致切片由于高溫干燥，造成陰陽(yáng)臉）；或?qū)?strong>抗原修復(fù)鍋置入冷水中降溫，待高壓鍋放氣后，打開(kāi)鍋蓋，將自來(lái)水直接沖入鍋內(nèi)，使緩沖液溫度降至45℃以下后，取出切片。
4、洗3分鐘進(jìn)行后進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。
此外，要想做好抗原熱修復(fù)，也要注意產(chǎn)品的質(zhì)量。因此，選擇抗原修復(fù)鍋主要考慮以下兩點(diǎn)：
1.抗原的自然特性以及所選擇的抗體
抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開(kāi)始的時(shí)候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的修復(fù)鍋。
2.固定液以及固定程度
建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對(duì)普通的適化狀態(tài)切片。如果用來(lái)切片的組織塊沒(méi)有充分固定，或者過(guò)固定（留在福爾馬林溶液中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)），或者用了其它的固定液，那么，處理組織切片的流程方案需要重新修訂，便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對(duì)于過(guò)固定的材料一般推薦用抗原修復(fù)鍋或者在同一修復(fù)鍋里面增加循環(huán)。
